多肽的溶解与保存

多肽有着很多特性，关于一些特殊肽您需要的有关信息可与博奥森公司的技术人员联系。当然首先建议您用少量肽来试验最适合的溶解方法，当多肽完全溶解后，才能加缓冲液（注意：应将多肽加入到适当溶剂中搅拌）。

一、冻干多肽的溶解

1、多肽溶解的主要问题是二级结构的形成。虽然疏水肽链二级结构的形成更明显，但除最短的肽链外，此现象产生在几乎所有肽链,与极性无关。所以，溶解多肽的第一个原则是使用无菌蒸馏水或去离子水，当然无氧水最好。多肽溶液可能遇到细菌降解，为防止此情况的发生，应溶解在无菌的蒸馏水中或用0.45或0.2孔径的滤膜过滤除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化，应溶于无氧的水中，无氧水可通过注入惰性气体（氮、氦、氩）减压除气得到；

2、若多肽不溶于纯水，超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。注意:超声处理会引起溶液发热或多肽降解；

3、若多肽含有多个碱性氨基酸，使用（1-10%）的乙酸水溶液：对于疏水性强的多肽，应使用50%的乙酸；

4、若多肽中含有大量酸性氨基酸，可用氨溶液（1-10%）或乙酸乙基或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。pH值在层析前必须调整；

5、异丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱，有机溶剂的量必须很少否则将严重影响停留时间；

6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香链而高度疏水、或为中性肽时，DMF或DMSO等膜变性剂的使用，有利于多肽的溶解：

a.高浓度模变性剂通过破坏多肽的二级结构而助溶；

b.膜变性剂适于多肽分析液的制备，但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰；

c.DMF是最佳变性剂（最高浓度可达30%），滴加至多肽溶解；

d.反相层析法时，DMF将与洗脱液前锋一起流出，根据入量的多少，峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF流出后几分钟内流出，若肽链很小，洗脱太早，多肽的量将很低。

二、冻干多肽的保存

标有“冻干保存”说明的多肽应该保存在冰冻条件下，以-20℃以下最佳，其活性可保持多年。当使用干冻产品时，开盖前其容器应在装有新鲜干燥箱内升至室温。-20℃的产品，此过程需要一小时或更长，随保装而定。否则，当容器打开，水气进入导致凝缩而降低稳定性。一旦打开，应迅速称量完毕，立即封闭以免潮解，亲水肽更应注意。

三、溶解多肽的保存

多肽溶液比干粉的稳定性差很多，为了获得较好的效果，遵循以下原则：

1、分成小包装避免反复冻融。使用多少解冻多少；

2、溶于pH5-7无菌的缓冲液中，-20℃储存；

3、由于细菌能降解多肽，储存前应过滤细菌；

4、包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化，因此应保存在无氧化剂的环境中。