在进行酶联免疫吸附试验前准备样品的技巧。
请参考您的工具包中包含的有关产品细节的协议，关于样品准备和兼容的样品类型。
本指南旨在提供教育资源。这是一般样品的制备指南，用于ELISA分析。正如检测开发的所有方面一样，最佳的样品制备程序将根据目标和分析的不同而有所不同。在开发一种新的分析方法时，查阅与你自己相似的实验例子是很好的做法。
样品的制备方法
细胞培养上清
在4°C将吸管细胞培养到离心管内，离心转速为1500转10分钟。
立即等分上清液和商店样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
细胞提取物
在冰上放置组织培养板。
涂片中轻轻洗细胞一旦与冰冷的PBS。
抽吸PBS和加入0.5毫升每100毫米板完整的提取缓冲液。
刮片在斜板上收集，取出预冷管。
涡简要和冰上孵育15-30分钟。
离心转速为13000转，转速为10℃，在4℃时不溶于颗粒。
Aliquot supernatant（这是可溶性细胞提取物）清洁，冷却管在冰店样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
条件培养基
将细胞置于完全（含血清）的培养基中，使细胞增殖到理想的汇合水平。
去掉生长介质，用几毫升热PBS轻轻冲洗。重复洗涤步骤。
去掉最后的PBS冲洗液，轻轻加入无血清培养基。
培养1-2天。
将试管移到离心管中，离心1500分钟，在4°C离心10分钟。
立即等分上清液和商店样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
鲜奶
在4°C收集样品，离心10000克，每次2分钟。
取上清液和店里的样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
等离子体
收集全血抗混凝剂含管，如BD VACUTAINER凝管（猫#：363080 / 363080）或添加0.1柠檬酸钠1 / 10册。
离心机在3000转10分钟，在4°C。
立即取上清液（血浆）和商店的样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
尿
在4°C收集样品，离心10000克，每次2分钟。
取上清液和店里的样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
唾液
在4°C收集样品，离心10000克，每次2分钟。
取上清液和店里的样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
血清
在未经处理的试管收集全血或，例如，一种抗凝血自由管如BD VACUTAINER血清管（猫#：367812）。
在室温下孵育20分钟不受干扰
离心机在3000转10分钟，在4°C。
立即取上清液（血清）和存储的样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
组织提取液
用干净的工具，在冰上最好和尽快地防止感兴趣的组织，以防止蛋白酶降解。
地方组织在圆底微量离心管中，浸泡在液氮“快速冻结”。储存样品在80°C，以备后用，或保存在冰上，以便立即均匀化。
一~ 5毫克的组织块，加~ 300µ完成提取缓冲液（见细胞/组织提取液配方）的管和均化用电动匀浆器。
用清水冲洗两次使用300µ完成提取缓冲区为每个冲洗叶片，然后保持2小时，不断搅拌，在4°C（例如放在冷室轨道摇床）。
离心20 min，在13000转4°C.放在冰上，取上清液（这是可溶性蛋白提取物）对新鲜，冷冻管和存储的样品在80°C.减少冷冻/解冻循环。
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溶解缓冲液的体积必须与目前组织的数量有关。最终蛋白提取液的典型浓度为1毫克/毫升。
细胞/组织提取缓冲配方
100 mM Tris，pH值7.4
150 mM NaCl
1毫米EGTA
1毫米EDTA
1% Triton X-100
0.5%脱氧胆酸钠
生产完全提取缓冲液所需的其他试剂。
磷酸酶抑制剂
蛋白酶抑制剂混合物
PMSF
补充磷酸酶和蛋白酶抑制剂的鸡尾酒被描述为制造商的细胞提取液，和PMSF至1毫米，使用前立即。
一般建议
建议蛋白质提取液浓度至少为1-2毫克/毫升。
通常，用结合缓冲液稀释血清、血浆、细胞和组织提取物50%。
在解冻前使用，离心样品在10000 rpm为5’在4°C，以消除任何沉淀物。​